冷凍(dong)治(zhi)療過程(cheng)中，組織和細(xi)胞(bao)經歷凍(dong)結、融化等過程(cheng)是(shi)導致其損傷的關鍵因素。

　　1、冷凍降溫時的作用

　　緩(huan)慢降溫時，低溫損傷源于“溶(rong)液(ye)效應”(即高溶(rong)液(ye)/溶(rong)質濃度下，細胞嚴(yan)重脫水(shui));快速(su)降溫時，低溫損傷源于致命的(de)細胞內冰晶(jing)形(xing)成。一些細胞存(cun)在冷凍保(bao)存(cun)的(de)最(zui)佳冷卻(que)速(su)率，證明(ming)了這(zhe)一假說的(de)合理性(xing)。

　　2、冷凍后復溫作用

　　快(kuai)速復溫(wen)，組織在(zai)較高溫(wen)度的情(qing)況(kuang)下，處于(yu)高濃度的電解質中(zhong)，易于(yu)破壞;緩慢復溫(wen)，可(ke)使組織在(zai)真正(zheng)溶解前(常在(zai)-10℃～0℃)再次形成冰晶，由(you)此形成大(da)冰晶破壞細(xi)胞膜。

　　3、細胞膜損傷

　　低溫使構成(cheng)細(xi)胞(bao)膜的主要成(cheng)分脂(zhi)質-蛋白復合物變性，致(zhi)使細(xi)胞(bao)破裂。

　　4、溫度(du)休克

　　低溫(wen)引起的局部溫(wen)度突然下(xia)降(jiang)致使(shi)細胞發(fa)生低溫(wen)性休克，引起細胞死亡。

　　5、血管(guan)性因素

　　冷凍引起血管(guan)痙攣，毛細血管(guan)內皮發生改變，血小板微血拴(shuan)形成(cheng)，血液有形成(cheng)分(fen)(fen)破壞(huai)并(bing)形成(cheng)凝塊。此外，在冷凍作用下，毛細血管(guan)通透性(xing)增(zeng)加(jia)，從而(er)引起血粘度增(zeng)加(jia)，靜水(shui)壓改變，血流(liu)緩慢。冷凍區(qu)周(zhou)圍動靜脈分(fen)(fen)流(liu)開(kai)放，也可造成(cheng)血流(liu)減少，導致組織(zhi)缺血缺氧性(xing)壞(huai)死(si)。故(gu)有學者認為血管(guan)性(xing)因素所致微循環障礙(ai)是冷凍后組織(zhi)壞(huai)死(si)的主要原(yuan)因。

　　6、臨界細(xi)胞容積學說(shuo)

　　認為(wei)在冷(leng)凍(dong)區進展中，細(xi)胞水分喪失(shi)，細(xi)胞皺縮，只(zhi)能耐受到最小容積。超過(guo)此極限(xian)，細(xi)胞就破壞，從而造成(cheng)組織損傷。

　　7、凋亡 在冷(leng)凍的分子生物學(xue)研究過程(cheng)中發(fa)現冷(leng)凍的邊緣區部分細胞有凋亡小(xiao)體，部分細胞呈現凋亡過程(cheng)。

　　二(er)、液氮容器冷凍(dong)方法

 　　1、液氮淺(qian)低溫冷凍(dong)：通(tong)過對細胞和組織無明顯損傷作(zuo)(zuo)用使局(ju)部皮膚(fu)治(zhi)(zhi)療(liao)溫度控制在-1℃～6℃之(zhi)間，從而產生某些生物學效應以達到治(zhi)(zhi)療(liao)目的冷凍(dong)方法。液氮淺(qian)低溫冷凍(dong)作(zuo)(zuo)用機制：

　　(1)血(xue)管性(xing)因素：由于較(jiao)弱的(de)冷刺激，局部(bu)血(xue)管先保護性(xing)收縮，復溫后毛細血(xue)管反射性(xing)擴張(zhang)，溫度升高，促(cu)進了血(xue)管的(de)新生和改善了血(xue)管的(de)舒(shu)縮功(gong)能;

　　(2)神(shen)經(jing)(jing)系(xi)統(tong)因(yin)素：由于局部冷刺激(ji)，可(ke)通過(guo)神(shen)經(jing)(jing)傳(chuan)導，調節中樞神(shen)經(jing)(jing)系(xi)統(tong)的功能(neng);同時，又通過(guo)反射作用(yong)于植物神(shen)經(jing)(jing)，也調節了(le)皮膚血管的收縮功能(neng);

　　(3)表皮增生。

　　2、液氮深低溫冷凍：通過對細胞和組織產生損傷或壞死作用以達到治療目的的冷凍方法。自增壓液氮罐