1.供試昆蟲本試驗研究的昆蟲樣本為亞洲小車蝗(Oedaleusasiaticus)成蟲，均采自內蒙古錫林郭勒盟多倫縣農牧交錯區草原，用養蟲籠活體帶回實驗室進行處理保存.液氮罐

2.液(ye)氮速凍(dong)處理取(qu)(qu)10頭活的亞(ya)洲(zhou)小車(che)蝗(huang)單頭裝(zhuang)入(ru)離心管中(zhong)，將離心管放入(ru)液(ye)氮中(zhong)速凍(dong)處理3min，取(qu)(qu)出后在室溫(wen)條件下放置12h觀察(cha)亞(ya)洲(zhou)小車(che)蝗(huang)存活情況。

3.樣(yang)本保存方(fang)法

(1)液氮速(su)(su)凍后保(bao)存(cun)將(jiang)采集(ji)帶回實驗室的活體(ti)蝗(huang)蟲樣(yang)本單頭裝入離(li)心管(guan)中(zhong)，將(jiang)離(li)心管(guan)放入液氮中(zhong)速(su)(su)凍處理3min，取(qu)出(chu)后放入-40℃冰箱中(zhong)保(bao)存(cun)備(bei)用。

(2)直接(jie)冷凍保(bao)存將采集帶回實(shi)驗室的活體(ti)蝗蟲(chong)樣本(ben)單頭(tou)裝入離(li)心管中(zhong)，直接(jie)放入-40℃冰箱(xiang)中(zhong)保(bao)存備用。

(3)乙醇(chun)保(bao)存(cun)將采集帶回實驗室的活(huo)體(ti)蝗蟲樣本放入(ru)無水(shui)乙醇(chun)(分析純)中保(bao)存(cun)備(bei)用。

(4)干制標本 將采集帶(dai)回來(lai)的(de)活(huo)體亞洲小(xiao)車蝗樣本放入毒(du)瓶中(zhong)毒(du)死(si)后(hou)，針插保存(cun)于(yu)標本室(shi)中(zhong)，待(dai)風(feng)干后(hou)進行DNA提取(qu)試驗。

4.DNA的提(ti)(ti)取(qu)將上述4種方(fang)法(fa)保(bao)(bao)存的蝗(huang)蟲樣本(ben)在(zai)3個(ge)月(yue)后進行DNA提(ti)(ti)取(qu)試驗。分別(bie)選用(yong)(yong)單頭亞(ya)洲小車(che)蝗(huang)的后足(zu)股(gu)節，無水乙醇(分析(xi)純)保(bao)(bao)存的蝗(huang)蟲后足(zu)股(gu)節需在(zai)提(ti)(ti)取(qu)之前先用(yong)(yong)無菌去(qu)離子水沖洗2～3次，將蝗(huang)蟲股(gu)節放入(ru)研(yan)缽中(zhong)用(yong)(yong)液氮研(yan)磨成(cheng)粉并移入(ru)1.5mL離心管(guan)中(zhong)，然后使用(yong)(yong)天根dp304動物(wu)基因組DNA提(ti)(ti)取(qu)試劑盒參照說(shuo)明書(shu)步驟進行基因組DNA提(ti)(ti)取(qu)。

5.DNA電泳檢測用1%的瓊脂糖凝膠電泳對提取的蝗蟲基因組DNA進行檢測。取DNA樣品3μL、上樣緩沖液2μL混勻后加入凝膠時預留的點樣孔中，加入DL2000Marker(TaKaRa;第3條帶為150ng/μL)，經過100V恒壓電泳20min，使用紫外凝膠成像系統觀察基因組DNA提取情況并拍照保存。液氮罐